El sistema Acinetobacter Baumannii Mla y el transporte de glicerofosfolípidos a la membrana externa

Mecanismos de transporte de solutos en bacterias

Las mutaciones en este residuo de lisina se inhiben para la unión de nucleótidos y la proteína mutada se vuelve inactiva. Fuera de las bacterias, se han encontrado proteínas que contienen el dominio MCE en los cloroplastos de las plantas. Los orgánulos de cloroplasto son didermas autorreplicativos, que tienen una membrana interna y externa. Los cloroplastos de plantas son capaces de síntesis de ácido fosfatídico de novo en el plástido o pueden importar PA del retículo endoplásmico, horoscoposdiarios.club distinguiéndose el origen del lípido por la longitud de la cadena en la posición sn-2. El PA sirve como precursor de numerosos galactolípidos importantes para las membranas de cloroplasto. En Arabidopsis thaliana, se demostró que las mutaciones en trigalactosyldiacilglicerol 1 a 3 alteran significativamente los lípidos plástidos. TGD1 y -3 son una permeasa de membrana interna y una ATPasa, respectivamente, que se asemejan al transportador ABC en bacterias.

Entre los 58 genes identificados en la pantalla, dos genes codificaban componentes del sistema Mla. El hallazgo de que las mutaciones en los genes mla dan como resultado defectos de permeabilidad de la MO en Ab concuerda con los datos anteriores informados en E.

Arquitectura del complejo transportador de Mlafedb

• coli Mla ha demostrado que MlaC interactúa tanto con el complejo IM MlaFEDB como con la lipoproteína OM putativa MlaA, y nuestros resultados respaldan un papel para MlaA en la función del sistema Mla general y la entrega de GPL al OM.
• Si bien aún no se conoce el mecanismo preciso de la inserción de GPL en el OM, el trabajo realizado en el sistema E.
• coli sugiere que la función del sistema es eliminar la GPL del prospecto exterior del OM para el transporte retrógrado de regreso al citoplasma basado en la observación de que E.
• Nuestros resultados usando este ensayo son consistentes con el funcionamiento del sistema Mla como un transportador de GPL anterógrado, sin embargo, no excluyen la posibilidad de un papel dual para los componentes Mla en el mantenimiento de la asimetría de lípidos OM.

Para caracterizar mejor el papel del componente de unión al sustrato periplásmico MlaC, realizamos experimentos de pulso de isótopos estables similares para observar el flujo de GPL recién sintetizadas en las cepas ∆mlaC. Los experimentos de isótopos estables en mutantes ∆mlaC revelan una acumulación IM de GPL recién sintetizados similar al resultado de mutantes ∆mlaF (Figura 5 — suplemento de la figura 2A), lo que indica laoracionasanjose.com que en ausencia del componente periplásmico, las GPL no se eliminan eficazmente del IM por resto del sistema Mla. También buscamos caracterizar el papel potencial de la supuesta lipoproteína OM MlaA, que ha sido implicada como un componente del sistema Mla en E. Se creó una cepa de deleción cromosómica de mlaA mediante intercambio alélico y se complementó con la expresión de MlaA a partir de un plásmido pMMB67EH-Kan.

coli y otros organismos Gram negativos (por ejemplo, Vibrio cholerae, Haemophilus influenza). Previamente, el Laboratorio Silhavy demostró que los mutantes de Mla muestran una mayor sensibilidad a SDS-EDTA y la eliminación de cualquiera de los componentes de Mla dio como resultado una localización errónea estufas-electricas.com de los fosfolípidos en la valva exterior de la membrana externa. Se encontró que la fosfolipasa de la membrana externa, PldA, era un supresor de la sensibilidad SDS-EDTA mutante mla. Este es un punto clave, ya que sugiere que la función del sistema Mla es eliminar los fosfolípidos del prospecto exterior.

Estos resultados son consistentes con un modelo en el que el complejo transportador ABC localizado en IM MlaBDEF primero transfiere GPL a la proteína de unión periplásmica MlaC, que luego transporta GPL al OM, después de lo cual MlaA facilita la inserción de GPL en el OM. Para excluir la posibilidad de que el defecto de la membrana fuera el resultado del efecto disruptivo de un complejo de proteína Mla parcialmente formado, diseñamos un componente de ATPasa enzimáticamente inactivo y expresamos la enzima defectuosa a partir de un plásmido. Razonamos que al expresar este alelo en las bacterias de tipo salvaje podríamos crear un efecto negativo dominante en la función de Mla. El residuo de lisina del motivo Walker A es particularmente esencial para la hidrólisis de ATP.