Estructura molecular del humano P

, no solo en la parte del lumen, aunque su presencia se predice en todo el cuerpo, sino que su expresión es más en las células enfermas, principalmente en las células cancerosas. La membrana plasmática de las células epiteliales intestinales bombea hacia atrás el fármaco que entra en ella y que se reconoce como sustrato y se excreta. Se observan niveles más altos en el epitelio biliar, los túbulos proximales del riñón y los fármacos se observan en la bilis y la orina. santamisa.es Aunque los inhibidores muestran la acción cuando se revisan en estudios preclínicos, su acción se retrasa cuando entran en los ensayos clínicos. El fracaso en la eficacia terapéutica del tratamiento del cáncer se debe principalmente a la sobreexpresión de P-gp. La importancia de la glicoproteína P en la práctica anestésica depende de su presencia en la barrera hematoencefálica, el tracto gastrointestinal, la placenta y otros sistemas de membranas del cuerpo.

Modelo animal

Para investigar el papel de estas hélices en la función de transporte de P-gp, sustituimos un grupo de 14 residuos conservados con alanina y generamos un mutante denominado 14A. Aunque el mutante 14A perdió la capacidad de bombear la mayoría de los sustratos probados fuera de las células cancerosas, sorprendentemente, adquirió una nueva función. De forma similar a la función de salida de la P-gp de tipo salvaje, encontramos que la captación por el mutante 14A depende de la hidrólisis de ATP, la concentración de sustrato y el tiempo.

Sin embargo, como demostramos en las siguientes secciones, el comportamiento exacto de cada TKI depende en gran medida de las escalas relativas de las afinidades de unión a NBD y SBD, así como de los coeficientes de partición de la membrana. Dado que un TKI necesita superar el flujo de salida de la P-gp antes de alcanzar la NBD, es probable que algunos de estos fármacos actúen como inhibidores de esta proteína transportadora solo cuando las concentraciones de estos fármacos sean lo suficientemente altas para pasar a través de la membrana al citoplasma. Estas predicciones son en gran medida consistentes con los resultados experimentales informados por Bates et al. sugiriendo que los tres TKI pueden superar la función de transportador cuando sus concentraciones son suficientemente altas. CsA, DGX, vincristina y terfenadina, que interactúan metabólicamente con ITZ, también son sustratos y / o inhibidores de la glicoproteína P (P-gp). La P-gp se identificó inicialmente como una proteína de la membrana plasmática sobreexpresada en las células tumorales. Se sabe que la P-gp se expresa no solo en las células tumorales sino también en las células normales, como las de la glándula suprarrenal, la membrana del borde en cepillo de los túbulos renales proximales, la membrana del canalículo biliar de los hepatocitos, la membrana apical de las células mucosas.

El nilotinib inhibe el flujo de paclitaxel de forma más eficaz que el imatinib y el dasatinib

La cavidad de unión al fármaco observada en las estructuras que miran hacia adentro se reorienta hacia el espacio extracelular y se comprime para evitar la unión del sustrato. La estructura evoca un modelo en el que la naturaleza dinámica de la glicoproteína P permite la translocación de una gran variedad de sustratos. Cuando se requiere quimioterapia para los tumores de células NK, puede ser necesario considerar el uso de medicamentos contra el cáncer que no sean un sustrato de la P-gp. Probamos si la captación aumentada por las células HeLa hipersensibilizadas mutantes 14A a Rh123 (ver diagrama esquemático del ensayo en la Fig. 2G).

Debido a la competencia por la P-gp, la cantidad de verapamilo transportado disminuirá, lo que dará como resultado un aumento de la radiactividad en el tumor. El transportador de la membrana plasmática ABCB1 o la glicoproteína P (P-gp) ligado a la resistencia a múltiples fármacos expulsa varios compuestos anfipáticos e hidrófobos tóxicos de las células, incluidos los fármacos contra el cáncer (1⇓⇓ – 4). Estructuralmente, la P-gp está compuesta por dos dominios transmembrana, cada uno de los cuales tiene seis hélices transmembrana y un dominio de unión a nucleótidos citosólico. Estudios recientes de microscopía crioelectrónica (crio-EM) han demostrado que la P-gp humana existe tanto en conformaciones internas abiertas como internas cerradas. El proceso está asociado con cambios conformacionales inducidos por la unión de ATP y la hidrólisis por los NBD. La permeabilidad del transportador de múltiples fármacos (la glucoproteína es un casete de unión al trifosfato de adenosina) responsable de la resistencia clínica a la quimioterapia.

en el intestino y las células endoteliales capilares del cerebro, los testículos y la placenta o el útero y que afecta el comportamiento farmacocinético de algunos fármacos. Recientemente, se informó que ITZ revirtió la resistencia a múltiples fármacos en células tumorales en experimentos in vitro. La expresión de la P-gp se encuentra principalmente en todas las partes del cuerpo actuando como un escudo protector contra la entrada de toxinas y xenobióticos. Su acción es inevitable en la barrera hematoencefálica, la barrera hematoplacentaria y la barrera hematoencefálica, pero cuando la concentración en el aspecto terapéutico de los fármacos se retrasa la absorción de los fármacos a través del intestino debido a la expresión de la P-gp en la luz intestinal.

• La salida de Rh123 de células NK fue inhibida por ciclosporina A y su análogo PSC 833, pero las células tumorales NK agresivas fueron menos inhibidas que las otras células NK.
• Mediante análisis de citometría de flujo utilizando el anticuerpo monoclonal MRK16 y el colorante rodamina 123, se encontró la expresión de P-gp y el flujo de salida de Rh123 en todas las muestras de NK excepto en una línea de células NK.
• El porcentaje de inhibición del flujo de salida en las células NK normales, las células NK-GLPD indolentes y los tumores de células NK agresivos fue 81,8% ± 0,9%, 93,4% ± 3,1% y 36,9% ± 11,7%, respectivamente, por 1 μmol / L de CsA, y 80,2% ± 3,6%, 91,7% ± 2,6% y 32,7% ± 10,1%, respectivamente, por 1 μmol / L de PSC833.

De acuerdo con la función de captación, la P-gp mutante también hipersensibiliza las células HeLa a Rh123 de 2 a 2,5 veces. La mutagénesis adicional identificó residuos de TMH 6 y 12 que forman sinérgicamente un interruptor en la región central de las dos hélices que gobierna si un sustrato dado se bombea fuera o dentro de la célula. La transformación de P-gp o de un exportador de fármacos ABC de un transportador de eflujo a una bomba de absorción de fármacos constituiría un cambio de paradigma en los esfuerzos por superar la resistencia a los fármacos contra el cáncer. En general, nuestros resultados apoyan la hipótesis de que los tres TKI son sustratos y también inhibidores de la P-gp.

Las células que sobreexpresan 14A se expusieron a concentraciones crecientes (0,25 a 50 µM) de Rh123 en un ensayo de citotoxicidad. Se usaron como controles células que expresan WT P-gp, que expulsa Rh123, y células que no expresan P-gp exógena o que expresan TMH 1,7 P-gp, que no transportan Rh123. 2H muestra que las células que expresan 14A están hipersensibilizadas a Rh123, con valores de concentración inhibitoria semimáxima que disminuyen de 6,08 ± 0,77 µM a 2,87 ± 0,3 µM. Este resultado confirma que un transportador de eflujo ABC diseñado puede funcionar como importador, aumentando así la acumulación de fármacos de quimioterapia en las células cancerosas, lo que conduce a la muerte celular. Las pruebas de citotoxicidad oraciones-catolicass.com con otros fármacos mostraron que las células que expresan el mutante 14A están ligeramente sensibilizadas a paclitaxel y doxorrubicina, pero no a colchicina o etopósido, lo que confirma la especificidad limitada de la función de importación del mutante. La glicoproteína P (P-gp), también conocida como ABCB1, es un transportador de la membrana celular que media la salida de fármacos anfipáticos químicamente diferentes y confiere resistencia a la quimioterapia en la mayoría de los cánceres. Las hélices transmembrana homólogas 6 y 12 de la P-gp humana conectan los dominios transmembrana con sus dominios de unión a nucleótidos, y varios residuos en estas TMH contribuyen al bolsillo de unión al fármaco.

La glicoproteína P extruye moléculas tóxicas y fármacos de las células a través de cambios conformacionales impulsados ​​por ATP. A pesar de décadas de esfuerzo, solo están disponibles las estructuras de la conformación orientada vaporetade-mano.com hacia adentro de la glicoproteína P. Aquí presentamos la estructura de la glicoproteína P humana en la conformación que mira hacia afuera, determinada por microscopía crioelectrónica a una resolución de 3.4 angstrom.

Desentrañar la droga compleja

Hasta ahora, se han descrito varios estudios con sustratos marcados con 99mTc y tomografía computarizada por emisión de fotón único para visualizar una captación disminuida de los complejos 99mTc-sestamibi y 99mTc-Q en tumores sólidos y en la barrera hematoencefálica debido a la expresión de P-gp . Sin embargo, nosotros y otros observamos, por ejemplo, que 99mTc-sestamibi es, además de P-gp, también un sustrato para MRP. En el presente estudio, se investiga la farmacocinética del verapamilo con PET en ratas portadoras de tumores. Para estos estudios, se inocularon ratas con una línea celular de carcinoma de pulmón de células pequeñas negativa para P-gp humana GLC4 y su sublínea GLC4 / P-gp transfectada con el gen MDR1, que sobreexpresa P-gp. El potencial del efecto de inversión de la P-gp por imágenes de la ciclosporina A sobre la farmacocinética tumoral del verapamilo se analizó mediante PET y se validó con estudios de biodistribución con daunorrubicina y verapamilo. Es decir, cuando el verapamilo se combina con ciclosporina A, ambos compuestos son transportados activamente por P-gp.