Evaluación del sistema de transporte Copan Eswab para determinar la viabilidad de hongos patógenos mediante el uso de una modificación del documento M40 del Instituto de Estándares Clínicos y de Laboratorio

Kits de recolección de Eswab, Copan Diagnostics

La tinción de Gram de las muestras genitales se puntuó en el sistema de clasificación de Ison et al, mientras que la tinción de Gram de los hisopos de heridas se evaluó siguiendo el método de puntuación Q de Matkosky et al. Cada kit estéril de un solo uso consta de un tubo con tapón de rosca de polipropileno que contiene 1 ml de medio líquido Amies y un aplicador con punta de fibra de nailon flocada. Después de la recolección, el hisopo se drena de manera espontánea y completa en el medio, proporcionando hasta 10 alícuotas idénticas de 100 µL para múltiples pruebas.

Se ideó un sistema para estandarizar suspensiones de inóculo homogéneas de conidios de diversos tamaños y esporangiosporas de hongos filamentosos. Se estandarizaron un total de 19 cepas clínicas y de referencia estufas-electricas.com a un estándar de turbidez de 0,5 McFarland con un fotómetro simple. Se obtuvieron recuentos de colonias iguales o superiores a los observados en el momento cero para todo el panel de prueba.

• Desde un punto de vista científico, era importante validar un amplio espectro de hongos patógenos para evaluar la viabilidad de este modo de transporte para permitir un trabajo exitoso.
• En el estudio actual, se probaron hongos potencialmente importantes desde el punto de vista clínico con una amplia gama de características físicas de propágulos, colores celulares y tasas y formas de crecimiento de colonias.
• La estandarización del inóculo y los métodos de recuento de colonias se modificaron para adaptarse a estas diferencias.
• Los hongos son organismos eucariotas con células que en su mayoría son relativamente grandes y robustas en comparación con las células bacterianas.
• Además, se desconoce si sus tamaños relativamente grandes o sus propiedades físicas, como exteriores hidrofóbicos o revestimientos mucoides, podrían interferir con el desprendimiento de los sistemas de transporte basados ​​en hisopos.
• No obstante, no se puede dar por sentado que estos organismos, cuando se transportan de la cabecera al laboratorio a través de métodos estándar de recolección de muestras, conservarán su viabilidad.

A medida que la incorporación de equipos nuevos y avanzados en los entornos de laboratorio microbiológico se vuelve más común, es crucial obtener los componentes más efectivos y confiables. El conocimiento de que los amies líquidos de Puritan con el hisopo flocado HydraFlock® es una alternativa superior al ESwab ™ de Copan ofrece a los compradores de laboratorio una opción preferible ya que llenan su inventario cada año. Aunque muchos procesadores de muestras están diseñados específicamente para su uso con la marca propia del fabricante del sistema de transporte de líquidos, otras marcas de tubos de transporte e hisopos pueden ser una alternativa más rentable y, a menudo, superior.

Los resultados indican que el sistema Copan ESwab mantiene eficazmente los organismos fúngicos oportunistas prevalentes durante al menos 48 h. Si bien muchos de estos sistemas son adecuados, KSVDL recomienda utilizar Copan Eswab ™ para el transporte de muestras de cultivos bacterianos. Todos los portaobjetos se tiñeron con Gram utilizando el TINTADOR DE DIAPOSITIVOS DE MICROBIOLOGÍA AEROSPRAY® (Delcon Italia, Arcore-Milán Italia) siguiendo las instrucciones del fabricante. Se llevaron unporque.com a cabo procedimientos de control de calidad para ayudar a garantizar que la información presentada fuera precisa, confiable y reproducible y para evaluar los reactivos de tinción de Gram y las técnicas de tinción. Se esparcieron unas gotas de aceite de inmersión sobre el frotis, que luego se examinó con un aumento de × 1000. Para garantizar la precisión de la interpretación, las tinciones de Gram fueron examinadas por dos personas competentes diferentes y revisadas por un supervisor.

Supervivencia de bacterias aeróbicas fastidiosas y no fastidiosas en tres sistemas de hisopos de transporte bacteriano. No se dispone de datos publicados formalmente sobre la viabilidad de los hongos filamentosos durante el transporte utilizando sistemas basados ​​en hisopos. Sin embargo, los datos preliminares se presentaron en 2010 en un póster en la 110ª Reunión General de la Sociedad Americana de Microbiología.

Por qué es tan importante validar los sistemas de transporte de líquidos

Recuperación de bacterias gramnegativas aerobias del sistema de transporte Copan Eswab después de un almacenamiento a largo plazo. Además, algunos medios de transporte están en tubos de vidrio por lo que no pueden enviarse a través de nuestra estación de tubo neumático. Y algunos medios (por ejemplo, medios virales) deben refrigerarse antes de la recolección de muestras para mantener la integridad de los medios.

Este sistema de recolección y transporte es una plataforma verdaderamente abierta adecuada para la automatización, tinciones de Gram y cultivo tradicional. ESwab ™ ha sido calificado por las principales plataformas de análisis para pruebas de antígenos moleculares y rápidas. En nuestro estudio, se encontró que la estandarización de la densidad se simplificó mediante el uso de un dispositivo fotométrico simple, DensiCheck Plus, para los ajustes del inóculo; resultó ser una muy buena alternativa a los espectrofotómetros más caros y menos fáciles de usar. Puede ser imperativo abordar estas cuestiones en un estudio posterior; sin embargo, estamos seguros de que ESwab es adecuado para la viabilidad y el transporte de hongos de acuerdo con el estándar CLSI para hongos clínicamente importantes. El sistema mantiene la viabilidad de bacterias aeróbicas, anaeróbicas y fastidiosas, en una sola formulación.

Normalmente, el panel estándar de cepas bacterianas elegido para validar el medio de transporte representa un grupo diverso de organismos de desafío bacteriano. Se evaluó el sistema Copan ESwab por su capacidad para mantener la viabilidad de hongos patógenos. Las pruebas siguieron el método de placa rodante del documento M40-A2 del Clinical and Laboratory Standards Institute a temperatura ambiente y del refrigerador.

Eswab