Interferencia química con los sistemas de transporte de hierro para suprimir el crecimiento bacteriano de Streptococcus Pneumoniae

En corroboración con este resultado, se demostró que una deleción de mce4 era defectuosa para la captación de colesterol. Esto da una idea de por qué los mutantes MCE en ciertas Actinobacterias pueden haber anulado la supervivencia de los macrófagos, ya que se cree que el colesterol es importante para la entrada celular de especies de micobacterias. Independientemente del papel funcional del colesterol en la invasión, se cree que la abundancia y el número de proteínas del dominio MCE en M. tuberculosis facilitan la captación descargarhappymod.com de varios tipos de lípidos, incluido el ácido palmítico, que sirve como una importante fuente de energía para M. Es poco probable que estas proteínas del dominio MCE estén involucradas exclusivamente en la mediación de la biogénesis de la membrana como mutante séxtuple de los 6 operones en el Mycobacterium smegmatis estrechamente relacionado que no exhibió alteraciones importantes en los lípidos celulares. Quedan por explorar muchas cuestiones importantes relacionadas con la función de los transportadores MCE.

Los transportadores ABC facilitan la participación de proteínas especiales que se unen al sustrato que se une al soluto e interactúa con la proteína de transporte de membrana para transportar el soluto dentro de la célula. Los transportadores ABC también participan software almacen en el bombeo de antibióticos en varias bacterias resistentes a los antibióticos. Las moléculas que entran en las bacterias gramnegativas deben atravesar la membrana externa antes de que los transportadores ABC y los sistemas de transporte activo puedan actuar.

Por lo tanto, las proteínas MCE parecen ser de importancia crítica para la función de la OM, pero su función y mecanismo de acción precisos siguen sin estar claros. El transporte activo es un proceso para transportar el soluto a una concentración más alta, es decir, contra el gradiente de concentración. Los microorganismos suelen vivir en ambientes que carecen de nutrientes, por lo que este proceso juega un papel importante para superar esas situaciones. Además, este proceso requiere energía para llevar adelante la absorción de nutrientes. Los transportadores de casete de unión de ATP son ejemplos importantes de sistema de transporte activo que está presente en bacterias, Achaea y eucariotas. Estos transportadores constan de dos dominios de membrana hidrófobos junto con dos dominios de unión de ATP.

Las estructuras cuaternarias sugieren mecanismos independientes para transportar sustratos; sin embargo, el mecanismo por el cual se produce el transporte a través de los complejos Pqi y Yeb es difícil de alcanzar. Ninguno de los dos está asociado con un transportador ABC, por lo que es más probable que diferentes dominios MCE dentro del polipéptido dado tengan diferentes afinidades por el sustrato o cambios conformacionales in vivo para impulsar el sustrato a través de la acción peristáltica. Aunque se ha demostrado que se une a las GPL, no hay evidencia bioquímica o genética directa sobre la función de Pqi y Yeb en bacterias Gram negativas. baumannii tiene un sistema Pqi homólogo, nunca se mutó en la evolución de A. baumannii deficiente en LOS, lo que sugiere que no es redundante con el sistema Mla.

Un ejemplo de este movimiento es el transporte de moléculas de fosfato en E. Las moléculas de fosfato inorgánico atraviesan la membrana externa por la participación del canal de la proteína porina. coli tiene camasconpalets.com 3 proteínas de dominio MCE detectables, MlaD, PqiB y YebT, cada una codificada en operones separados. coli, lo que sugiere que todas podrían tener un papel en el transporte de lípidos en gramnegativos.

• En segundo lugar, los lípidos pueden translocarse a lo largo de un surco hidrófobo en un puente entre el MI y el OM, como en el transportador de LPS.
• Y tercero, los lípidos pueden ser transportados a través del interior de túneles cerrados alargados formados por proteínas de dominio MCE grandes, como en PqiB y YebT.
• De acuerdo con la posibilidad de que Mla funcione como un transportador anterógrado, el OM de los mutantes muestra una reducción general de GPL junto con una acumulación excesiva de GPL recién sintetizada en el IM.
• En primer lugar, se puede emplear una proteína transportadora de lípidos soluble como MlaC, con una bolsa hidrófoba que acepta las colas de lípidos, protegiéndolas del disolvente a granel.

En el caso del transporte de LPS, el complejo IM LptBFG utiliza la hidrólisis de ATP para extraer moléculas de LPS del IM y transportarlas a través del puente LptACD al OM. Es concebible que los sistemas Mla, Pqi y Yeb puedan funcionar de manera similar, utilizando la hidrólisis de ATP para impulsar la exportación de fosfolípidos para crear una nueva membrana a medida que la célula crece, quizás junto con otros mecanismos de transporte. Según nuestra comprensión del sistema Mla, es probable que los componentes que abarcan el periplasma YebT y PqiB unan proteínas en el MI y el MO para facilitar el transporte de sus sustratos. Una pequeña lipoproteína codificada inmediatamente aguas abajo de pqiB, llamada PqiC, puede ser parte de un complejo de membrana externa que interactúa con PqiB, aunque no hay ningún gen homólogo presente en el operón yeb. De manera similar, las proteínas de membrana integrales predichas YebS y PqiA, codificadas justo aguas arriba de yebT y pqiB, y aparentemente estructuralmente diferentes de MlaE, pueden formar parte de complejos IM para cada sistema, aunque faltan genes de ATPasa en los operones yeb y pqi. , o incluso facilitar el equilibrio pasivo de lípidos entre el MI y el MO en lugar del transporte activo.

Al cultivar cultivos en acetato sin marcar, luego ‘pulsando’ con acetato 2-13C y analizando fracciones de membrana separadas de puntos de tiempo establecidos, podemos observar el flujo de GPL recién sintetizadas entre el MI y el MO de A. Una fuente adicional de información sobre la función de Mla reside en las funciones establecidas de otras proteínas que contienen el dominio MCE tanto en procariotas como en eucariotas. La primera proteína del dominio MCE se caracterizó inicialmente por un estudio histórico en 1993 que identificó una región del genoma de Mycobacterium tuberculosis que confería la capacidad, cuando se expresaba heterólogamente en E. identificaron genes regulados positivamente durante el crecimiento con colesterol, uno de los cuales fue el grupo de genes mce4ABCDEF.

El sistema Phncde transporta Pi

baumannii no tiene ninguna enzima PagP conocida, pero una actividad similar de las múltiples fosfolipasas OM predichas podría explicar la reducción de la OM GPL observada por TLC y espectrometría de masas cuantitativa. Por lo tanto, diseñamos un ensayo basado en espectrometría de masas para estudiar el transporte intermembrana de GPL utilizando el marcaje de isótopos estables 13C (Figura 5 — suplemento de figura 1A), para analizar mejor la direccionalidad del transporte de GPL por el sistema Mla entre las membranas bacterianas. La acetil CoA, el metabolito precursor de la biosíntesis de ácidos grasos, primero se convierte en malonil-CoA y entra en la vía FasII que suministra ácidos grasos sintetizados endógenamente a macromoléculas como lipopolisacáridos, fosfolípidos, lipoproteínas y metabolitos que contienen lípidos.

Captación de fosfato por el sistema de transporte de fosfonato Phncde

La disminución general de los glicerofosfolípidos de la membrana externa de los mutantes A. coli ha demostrado que la interrupción de genes en la vía Mla da como resultado la activación de la OM aciltransferasa PagP, que escinde un resto palmitato de GPL y lo transfiere a LPS y PG, creando una hepta.

Captación de hierro

A partir de análisis genéticos, MlaD parece ser dominante ya que un mutante mla parece tener fenotipos idénticos al mutante triple mla, pqi, yeb con respecto a la sensibilidad a los detergentes. La viabilidad de la triple deleción elimina la posibilidad de que estos sistemas funcionen colectivamente como transportadores anterógrados redundantes, un punto clave al considerar la direccionalidad del transporte. El trabajo estructural mostró que cada uno de los 3 operones MCE transcribe proteínas que tienen un número variable de dominios MCE y estructuras cuaternarias radicalmente diferentes. Cada una de estas proteínas forma hexámeros simétricos con los dominios MCE apilados verticalmente. MlaD, que tiene un dominio MCE, permanece en estrecha asociación con el transportador ABC MlaEF. YebT tiene 7 dominios MCE que forman 7 anillos apilados, lo que da como resultado un tubo de ∼230 Å de largo capaz de atravesar el periplasma. Finalmente, PqiB, que tiene 3 dominios MCE, forma 3 anillos apilados con los terminales C formando una estructura en forma de aguja que nuevamente podría abarcar ∼230 Å.