Sistema de transporte de electrones

La interpretación de la función de transporte retrógrado también se basó en la existencia de un sistema ortólogo en los cloroplastos vegetales que transporta lípidos desde el retículo endoplásmico al orgánulo. Sin embargo, dado que las bacterias Gram-negativas sintetizan GPL dentro del MI, el transporte retrógrado de GPL solo sería necesario para el reciclaje de GPL mal localizado en el prospecto exterior de MO. Aunque esta es una inferencia razonable basada en los datos disponibles en ese momento, señalaríamos que la direccionalidad del transporte descargarpseint.online por el sistema E. coli Mla no se había probado a fondo de forma experimental utilizando análisis de membrana o con un ensayo funcional del tipo realizado aquí. Es concebible que la función de importación del sistema TGD de cloroplasto ortólogo sea el resultado de la adaptación al entorno intracelular, habiendo evolucionado el sistema en este caso para ayudar en la transferencia de GPL desde el ER cercano al cloroplasto. baumannii, demostramos aquí que ambos complejos poseen una arquitectura similar, lo que apunta a una función conservada.

Los fenotipos de defectos de la membrana externa observados en mutantes de E. coli mla también podrían explicarse por una alteración de la estructura de la OM derivada de concentraciones reducidas de OM GPL, lo que lleva a la activación de la enzima PagP. coli mutantes mla contenga GPL en el prospecto exterior, pero existe la posibilidad de que OM GPL pueda volcarse en el prospecto exterior en condiciones de daño de OM resultante de un desequilibrio de las proporciones de LPS a GPL. Sin embargo, la determinación final de la direccionalidad del transporte de GPL por el sistema Mla en E. coli y otros organismos requerirá estudios de transporte intermembrana similares a los que se han hecho aquí para A.

La estructura de Mlac muestra que se une a las colas de lípidos

baumannii Mla es el tráfico de GPL desde el MI, a través del periplasma, para su entrega a la membrana externa. De acuerdo con este modelo, la hidrólisis de ATP por MlaF proporciona la energía inicial para extraer GPL del MI, mientras que los componentes de unión al sustrato MlaD y MlaC absorben lípidos para entregarlos al MO.

Según este modelo, las mutaciones en MlaA serán fenotípicamente similares a las mutaciones en otros componentes del sistema Mla, y esperaríamos observar una tasa disminuida de transporte de GPL anterógrado. Está establecido que existen mecanismos celulares en bacterias Gram-negativas para resistir condiciones estresantes que conducen a la alteración de la MO. Por ejemplo, las enzimas fosfolipasa de OM, como PldA, se activan en condiciones de estrés de la membrana para digerir la GPL en la valva exterior de la MO, ya que los niveles altos de GPL en la valva exterior desestabilizan la función de barrera de la OM.

Sin embargo, los datos disponibles apuntan más claramente a un modelo de transporte de GPL anterógrado por MlaFEDB y MlaC, facilitado de alguna manera por MlaA. Estos datos estructurales nos permiten generar un modelo de cómo los sistemas de transporte MCE trafican lípidos a través del periplasma. Sin embargo, como la dirección de transporte no se ha establecido de manera absoluta, estos sistemas también podrían impulsar la importación de lípidos hacia la membrana interna, con los pasos descritos en el orden inverso. La unión de MlaC al complejo MlaA-OmpC / OmpF unido a lípidos da como resultado la transferencia del lípido al bolsillo hidrófobo oracionasanjudas-tadeo.com de MlaC, donde está protegido del disolvente. El MlaC unido a lípidos puede luego difundirse a través del periplasma hasta el complejo MlaFEDB en el MI, donde la hidrólisis del ATP puede facilitar la extracción del lípido de MlaC y / o la translocación del lípido en el MI. Por lo tanto, parece que se han desarrollado al menos tres estrategias únicas para el transporte de lípidos entre el MI y el MO de las bacterias de doble membrana y los cloroplastos. En primer lugar, se puede emplear una proteína transportadora de lípidos soluble como MlaC, con una bolsa hidrófoba que acepta las colas de lípidos, protegiéndolas del disolvente a granel.

3 dominio helicoidal

En segundo lugar, los lípidos pueden translocarse a lo largo de un surco hidrófobo en un puente entre el MI y el OM, como en el transportador de LPS. Y tercero, los lípidos pueden ser transportados a través del interior de túneles cerrados alargados formados por proteínas de dominio MCE grandes, como en PqiB y YebT. baumannii que son esenciales para su barrera OM que condujo a la identificación de un sistema de transporte ABC cuya actividad ATPasa mantiene la función de barrera OM. Los componentes IM y periplásmico de este sistema se pueden purificar, unir GPL y ensamblar en un complejo de proteínas definido con una simetría significativa, lo que indica que este sistema podría funcionar para transportar GPL desde el IM al OM. De acuerdo con la posibilidad de que Mla funcione como un transportador anterógrado, el OM de los mutantes muestra una reducción general de GPL junto con una acumulación excesiva de GPL recién sintetizada en el IM. Por tanto, estos resultados nos llevan a proponer que la función del sistema A.

Nuestros resultados usando este ensayo son consistentes con el funcionamiento del sistema Mla como un transportador de GPL anterógrado, sin embargo, no excluyen la posibilidad de un papel dual para los componentes Mla en el mantenimiento de la asimetría de lípidos OM. Se ha interpretado que el trabajo previo realizado en el sistema ortólogo Mla en E. coli sugiere que la función del sistema es eliminar la GPL del prospecto exterior del OM para el transporte retrógrado de regreso al citoplasma basado en la observación de que E. coli mla los mutantes probablemente contienen GPL en el prospecto exterior del OM. Esta función propuesta se infirió a partir de la observación de que las deleciones de genes dieron como resultado un aumento de la activación de las enzimas OM-fosfolipasa PagP y OMPLA, lo que sugiere una mayor cantidad de GPL en el prospecto exterior de la OM.

• Está establecido que existen mecanismos celulares en bacterias Gram-negativas para resistir condiciones estresantes que conducen a la alteración de la MO.
• La estructura propuesta de MlaA en el OM apoya el argumento de que MlaA está involucrado en la eliminación de GPL del prospecto exterior, y se sugiere que GPL del prospecto exterior viaje a través de un poro en MlaA donde son recibidos por MlaC, sin embargo, nuestros datos revela que los mutantes ∆mlaA de A.
• Estos datos pueden conciliarse mediante un modelo en el que MlaA funciona tanto para eliminar la GPL mal localizada del prospecto exterior del OM, y además sirve para facilitar la entrega de GPL al OM por MlaC, quizás al permitir la localización de MlaC en la superficie del interior.
• El gen de MlaA, el componente de OM propuesto, se encuentra en una ubicación cromosómica diferente del resto del operón mla.

El gen de MlaA, el componente de OM propuesto, se encuentra en una ubicación cromosómica diferente del resto del operón mla. La estructura propuesta de MlaA en el OM apoya el argumento de que MlaA está involucrado en la eliminación de GPL del prospecto exterior, y se sugiere que GPL del prospecto exterior viaje a través de un poro en MlaA donde son recibidos por MlaC, sin embargo, nuestros datos revela que los mutantes ∆mlaA de A. Estos datos pueden conciliarse mediante un modelo en el que MlaA funciona tanto para eliminar la GPL mal localizada del prospecto exterior del OM, y además sirve para facilitar la entrega de GPL al OM por MlaC, quizás al permitir la localización de MlaC en la superficie del interior.

baumannii, junto con estudios similares a los realizados para el transporte de Lpt LPS. sistema para el cual se define funcionalmente la transferencia molecular de LPS de molécula a molécula del sistema Lpt. Tras la introducción del modelo de transporte retrógrado para la función de Mla en la literatura existente, varios estudios han examinado los efectos fenotípicos de la alteración de Mla en varios organismos. En un estudio reciente en PNAS, Powers y Trent obtuvieron por primera vez A. baumannii deficiente en lipooligosacárido por selección oraciones-poderosass.com en presencia de polimixina B. Luego realizaron un experimento de evolución, pasando las cepas en cultivos que contenían polimixina B durante 120 generaciones, momento en el que observaron un crecimiento significativamente mejorado en las poblaciones. También se observó que estas poblaciones evolucionadas tenían una mayor resistencia a los antibióticos, incluyendo vancomicina, bacitracina y daptomicina, y parecían más consistentes morfológicamente en relación con las cepas no evolucionadas cuando se observaban microscópicamente.

Para tener en cuenta la diferencia de energía, se propone una molécula aceptora hidrófoba para permitir que los lípidos se disocien completamente del resto del transportador ABC y facilitar la eliminación completa de la bicapa. La estrecha asociación de MlaD con la valva externa del MI puede permitirle extraer lípidos del MI por interacción hidrófoba con las cadenas de acilo después de la hidrólisis del ATP por MlaF. El tráfico posterior a través del periplasma implica entonces a la proteína de unión a GPL periplásmica MlaC, que probablemente acepta GPL de MlaD y luego las lleva al OM. Si bien aún no se conoce el mecanismo preciso de la inserción de GPL en el OM, el trabajo realizado en el sistema E. coli Mla ha demostrado que MlaC interactúa tanto con el complejo IM MlaFEDB como con la lipoproteína OM putativa MlaA, y nuestros resultados respaldan un papel para MlaA en la función del sistema Mla general y la entrega de GPL al OM.